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想知道核酸凝膠染料的特點不妨看看這些

 更新時間:2020-07-20 點擊量:1657

  你知道核酸凝膠染料有哪些特點么?下面就讓我們一起來了解一下吧。

  1、無毒性:*的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內,艾姆斯氏試驗結果也表明,該染料的誘變性遠遠小于EB。

  2、靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBRGreenI。

  3、穩(wěn)定性高:適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強。

  4、信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。

  5、操作簡單:與EB一樣,在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。

  6、與EB有相同的光譜特性,無需改變?yōu)V光片及觀察裝置:標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在300nm紫外光附近可得到*激發(fā)。

  但是不能被488nm氬離子激光器或相似波長的可見光*激發(fā),因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。對于此類裝置,我們推薦您使用DuGreen(Cat#011或012),它和SYBRGreenI的光譜相似,靈敏度相當,但更加穩(wěn)定。

  核酸凝膠染料注意事項:

  1、此方法染色染料用量相對較少。500μL染料大約可以做100塊50mL的膠。

  2、由于具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。

  也可以選擇將儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

  3、如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。

  4、此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。

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